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如何从发酵液中分离一种未知的物质 在使用碟片离心机分离发酵液中,发现重相中含所需要的物质较多,...

来源:www.baiyundou.net   日期:较早时间
如何从发酵液中分离一种未知的物质
考虑几面:
1)初步确定发酵液性份性质,HPLC显示都极性非强说明水溶性,足判断性质;查阅质料,看相关菌种产性物质种类,设计相关实验进行初步验证,比抗素能产抑菌圈,蛋白酶能水解蛋白质底物形透明圈等相关实验;
2)根据性性质设计离纯化;
3)发酵液预处理,首先要滤除菌体等发酵液能溶解杂质,产色素先除色素,免干扰面离程;同要根据性性质性进行定浓缩处理,再根据要用柱进行必要处理,比透析盐等,同要注意预处理程尽量保持性性.
离菌体,先用各种机溶剂甲醇、氯仿等进行萃取,检查萃取液与沉淀物质性,确定性致性质;先用盐析,用硫酸氨等进行盐析,测试性.些工作完,放柱进行初步纯化,收集性物组.必要,低压色谱柱或高压色谱.收集性峰,般经高效液相色谱,比较纯.
性物质极性强,需要换根离极性物质柱,像C18或凝胶柱.
发酵液预处理固液离
根据性物质许范围,采取酸化、加热、滤、絮凝、离等.
提取(离浓缩)
经采用化萃取、树脂吸附、沉淀等.
精制(纯化)
采用结晶、脱色、色谱层析等.
外提取步骤应用沉淀、吸附等用于品纯化.
提取选择
1.产品基本理化性能,化结构、化合物溶解度、极性、pK值、官能团反映等.
2.化合物稳定性,耐受pH范围、耐受温度条件、光照、氧化等.
外,离纯化程值提及,尽能避免二污染.离纯化程使用水要求离,机溶剂要求高纯级,使用树脂应该经预处理除其残留杂质等.
Hplc纯化试试调节pH值,适降低乙腈或甲醇量

在使用碟片离心机分离发酵液中,发现重相中含所需要的物质较多,如何处理?~

如果固相比较多,前面可以先用卧螺做预处理,这样以减少碟片机的压力。

1、超高压提取法属于非加热处理加工法,可以克服传统的加热处理方法提取出的活性物质活性低下的缺点。
优点:压力迅速、均匀作用到要提取的素材,可以开发出与热处理方式不同物性的成分,具有与热处理同样高的提取效率。
缺点:设备投资高昂,难以分解残留的农药,不同素材的压强研究进展缓慢。
2、超声波提取法是利用多种不同的超声波,引起分子振动的技术。相比传统的热水提取法,超声波提取法不会造成有效成分的破坏、损失较少,同时,通过Cabitation过程可以稳定地提取有效成分。
优点:反应速度非常快,破坏植物组织很容易,可短期内提取出所需物质最大限度维持活性物质的功效,没有残留物。
缺点:只有对物理上稳定的素材才适用,活性物质容易被破坏,需要大量提取时效率低下。
分离提取的应用:
一,料液各组分的沸点相近,甚至形成共沸物,为精馏所不易奏效的场合,如石油馏分中烷烃与芳烃的分离,煤焦油的脱酚;
二,低浓度高沸组分的分离,用精馏能耗很大,如稀醋酸的脱水;
三,多种离子的分离,如矿物浸取液的分离和净制,若加入化学品作分部沉淀,不但分离质量差,又有过滤操作,损耗也大;
四,不稳定物质(如热敏性物质)的分离,如从发酵液制取青霉素。

扩展资料:
分离提取也叫萃取。
分离提取的原理:
利用物质在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使物质从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。经过反复多次萃取,将绝大部分的化合物提取出来。
溶剂萃取工艺过程一般由萃取、洗涤和反萃取组成。一般将有机相提取水相中溶质的过程称为萃取(extraction),水相去除负载有机相中其他溶质或者包含物的过程称为洗涤(scrubbing),水相解析有机相中溶质的过程称为反萃取(stripping)。
分配定律是萃取方法理论的主要依据,物质对不同的溶剂有着不同的溶解度。同时,在两种互不相溶的溶剂中,加入某种可溶性的物质时,它能分别溶解于两种溶剂中。
实验证明,在一定温度下,该化合物与此两种溶剂不发生分解、电解、缔合和溶剂化等作用时,此化合物在两液层中之比是一个定值。不论所加物质的量是多少,都是如此。
参考资料:百度百科:萃取

相关要点总结:

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