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“观察DNARNA在细胞中的分布”的简化实验:观察DNA和RNA在细胞中的分布

来源:www.baiyundou.net   日期:较早时间
  “观察DNA、RNA在细胞中的分布”是人教版生物必修一第二章第三节的实验。教科书建议使用人口腔上皮细胞做材料,进行固定、酸解、漂洗、染色等一系列操作,观察DNA、RNA在细胞中的分布。但在教学实践中发现,按照教科书所示的实验方法难以做出预期的实验结果。常见口腔上皮细胞整个被染成粉红色,既没有出现甲基绿的颜色,也不能清晰分辨RNA的颗粒结构。
  该实验原理是利用甲基绿和吡罗红对DNA和RNA亲和力的不同,让甲基绿与DNA结合,使DNA呈现绿色;让吡罗红与RNA结合,使RNA呈现红色。现今对这一染色机理有两种解释:电离作用与聚合作用。
  (1)电离作用:DNA和RNA都有磷酸基和碱基,为两性电解质,在一定的条件下可电离,因此都有等电点。甲基绿和吡罗红在水中电离后都产生阳离子。甲基绿电离后带两个正电荷,碱性较强。吡罗红电离后仅带一个正电荷,碱性较甲基绿弱。染色时两者竞争,碱性较强的甲基绿与细胞核形成极性吸着而结合,等电点为pH3.8~4.8。碱性较弱的吡罗红与细胞质吸附结合,等电点pH4.6~5.2。(2)聚合作用:甲基绿对聚合高的DNA有亲和力,吡罗红对聚合低的RNA有亲和力。
  由染色机理可见,甲基绿与吡罗红的细胞染色对pH要求很高。教材提供的试剂配方也提到B液需将pH调整到4.8,正是保证了甲基绿与吡罗红与细胞器结合的pH条件。可是根据教材所给的操作步骤,口腔上皮细胞需要经过5min的酸解和10s的冲洗,这一操作显然很难完全去除残留的盐酸,导致细胞在染色前已经形成低pH的环境,染液无法在适宜的pH下染色,最终染色失败。根据实践经验,若pH偏低,甲基绿染色效果不好;若pH偏高,则吡罗红染色效果差。在pH极低的环境下,甲基绿完全不着色。
  根据以上对染色原理及操作步骤的分析讨论,现提出一种以洋葱内表皮为实验材料的简化实验方法:
  (1)在干净的载玻片上滴加一滴现配的吡罗红甲基绿染色剂。
  (2)撕取洋葱内表皮,置于染色液中。
  (3)染色1min。
  (4)盖上盖玻片,吸去多余染液,显微镜观察。
  这一简化方法保证了细胞染色全程在适宜的pH下进行,能产生预期的染色效果,明显可见细胞核被染成绿色,细胞质里有颗粒状结构被染成红色。其次,利用植物细胞的特性,可省略固定及酸解步骤,节省操作时间,减少出错机会。
  经改进,本实验成功率达100%,实验操作时间节省60%。课堂上学生能有更多的时间进行显微镜观察,教师也有充裕的时间进行理论讲解与个别指导。这种简化方法既增加了学生的成功体验,也提高了教学效率,广受师生的欢迎与肯定。
  可根据具体染色情况,调整甲基绿水溶液与吡罗红水溶液的比例。

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相关要点总结:

13652056809:“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,正确的操作步骤是
汲顾答:(4)DNA和RNA在细胞核和细胞质中都有分布,只是量的多少不同。其正确的操作步骤是④取口腔上皮细胞制片②水解③冲洗涂片①染色⑤观察;故选C。考点:观察DNA和RNA在细胞中的分布 点评:本题较容易,要求学生掌握观察DNA和RNA在细胞中的分布的实验操作步骤,考查学生对显微镜操作的能力。

13652056809:观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中,下列操作正确的是( )A.观察时应选...
汲顾答:A、在观察二者的分布时,要用光学显微镜在低倍镜下观察,所以染色不能太深,否则影响观察效果,A正确;B、将涂片用质量分数为8%的盐酸处理后,还需用蒸馏水冲洗才能用染色剂染色,B错误;C、染色时,用甲基绿、吡罗红混合染色剂,C错误;D、先用低倍镜找到清晰的细胞后,还需移到视野的中央才能转...

13652056809:观察“DNA和RNA在细胞中分布的实验”中,正确的步骤是( )A.取细胞...
汲顾答:观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,第一步是取材制片:一般选择易获取的口腔上皮细胞,第二步是水解:用盐酸处理使口腔上皮细胞膜通透性增大,染色质中DNA和蛋白质分离;第三步是冲洗:洗去盐酸;第四步是染色:用吡罗红甲基绿染色剂染色;第五步是观察:先用低倍镜观察,再用高倍镜观察.故选:...

13652056809:观察DNA和RNA在细胞中的分布,所运用的原理是( )
汲顾答:【答案】C 【答案解析】试题分析:观察DNA和RNA在细胞中的分布的实验原理是:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,利用甲基绿和吡罗红混合染色剂对细胞染色,同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。故选C 考点:本题考查观察DNA和RNA在细胞中的分布的实验原理。点评:本题意在考查考生的识记...

13652056809:生物学实验中,在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”时...
汲顾答:(2) 绿 红 细胞核 细胞质 (3)不行 人的成熟的红细胞没有细胞核,而DNA主要存在于细胞核中,所以DNA的分布看不到 。【答案解析】试题分析:(1)“观察DNA和RNA在细胞中的分布”时加入盐酸的作用是改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;使染色体的DNA和蛋白质分离;(2)细胞核中...

13652056809:在“观察DNA和RNA在细胞中分布”的实验中,下列说法...
汲顾答:可迅速杀死细胞,防止细胞死亡时溶酶体对核酸的破坏,D正确。考点:本题考查“观察DNA和RNA在细胞中分布”的实验,意在考查能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验,包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。

13652056809:“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,正确的实验步骤是
汲顾答:回答:答案B 本题考查观察DNA和RNA在细胞中的分布的知识,属于考纲理解层次。“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,第一步是取材制片:一般选择易获取的口腔上皮细胞,第二步是水解:用盐酸处理使口腔上皮细胞膜通透性增大,染色质中DNA和蛋白质分离;第三步是冲洗:洗去盐酸;第四步是染色:用吡罗红甲基绿染...

13652056809:观察dna和rna在细胞中的分布观察时应选择什么样的区域
汲顾答:A、实验步骤是制片→水解→冲洗→染色→观察,A错误;B、观察时应选择染色均匀、色泽较浅的区域,B错误;C、经吡罗红甲基绿染色后,可观察到绿色的细胞核,C错误;D、盐酸使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于染色剂和DNA结合,D正确.故选:D.

13652056809:选择口腔上皮细胞作实验材料观察dna和rna在细胞内的分布
汲顾答:A错误;B、显微镜下观察绿色只出现在细胞核中,说明DNA主要分布于细胞核,B错误;C、该实验的结果说明DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中,C错误;D、癌细胞分裂间期,细胞核中进行转录过程,合成大量的RNA,用甲基绿和吡罗红染色后,会发现红色区域覆盖率更高,D正确.故选:D.

13652056809:观察dna和rna在细胞中的分布实验效果怎样
汲顾答:甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同:甲基绿+DNA→绿色 吡罗红+RNA→红色 2.分布:真核生物DNA主要分布在细胞核中;线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。3.实验结果:细胞核呈绿色,细胞质呈红色.4.实验结论:DNA主要分布在细胞核中;RNA主要分布在细胞质中;

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