细胞DNA提取试剂的选择
众所周知，细胞、组织DNA提取的主流方法主要有磁珠法和离心柱法。关于这两种方法的优劣想必大家在很多资料中已经有所了解，磁珠法针对大批量样本，可自动化作业，但提取的DNA纯度低，得率也较低，而且容易引发交叉污染，导致假阴性检测结果；离心柱法适合手动提取或半自动化提取，工作效率低一些，但提取的DNA纯度较高，得率也较高。
如果样本不是太多或者样本比较珍贵，而且实验对DNA提取结果要求比较高，个人建议最好采用离心柱法。那么，面对种类繁多的离心柱法试剂盒，我们应该如何选择？接下来我们就看一下有哪些因素需要考虑。
一、较高的DNA提取得率。对离心柱法而言，细胞DNA提取得率的高低主要取决于离心柱对核酸的吸附能力、洗脱能力以及裂解液的裂解消化能力。离心柱的硅胶膜DNA吸附性能好、裂解液裂解能力强、洗脱液洗脱能力好，核酸的提取得率就高。反之，DNA的提取得率就不高。我们可以采用紫外分光光度法进行DNA提取得率的测定，但是不能作为判断得率的唯一标准，最好还是要做个PCR或荧光定量。细胞数量与提取的核酸量成正比，如果要提高核酸得率，可通过增加细胞量来实现。一般先提取105-106的细胞量（最好不超过107 Cell，可用细胞计数方法进行细胞计数），如结果不理想可考虑增加细胞量。但如果增加细胞量还不能得到满意结果，应及时考虑更换试剂盒。目前国内常用的细胞DNA提取试剂有国外品牌Q，国产品牌Biog和T等。根据我们的经验，Q细胞DNA的提取得率，一般107细胞样本在40-60ug。Biog与Q公司的DNA提取得率相近，106-107细胞样本在30-60ug；T公司 106-107细胞样本DNA得率在20-50ug，都能满足下游PCR实验的要求。
二、DNA提取纯度高。我们一般采用紫外分光光度法测定OD260/OD280比值来估计核酸纯度。一般DNA 溶液OD260/OD280比值应在1.6--1.8之间，如果提取的DNA溶液该比值小于1.6，通常说明有蛋白质或酚、多糖等的污染。如果提取的DNA溶液该比值大于1.9，则表明有RNA污染。不同品牌的试剂盒提取的DNA纯度略有差别，国产试剂盒Biog和T的DNA提取纯度差不多，都可以直接应用于基因检测、PCR、qPCR、分子杂交等。Q的纯度略高，一般在1.7-1.9，除了以上应用，还可用于对纯度要求略高的实验，如二代测序等。
三、产品价格。市面上的试剂盒价格参差不齐，各个实验室的经费情况也不尽相同，所以价格也是客户选购产品的重要因素。对于绝大多数实验如PCR、qPCR、基因检测、分子杂交等，国产试剂盒都能满足质量要求。与国外知名品牌相比，国产试剂盒的价格较为便宜，一般只有国外品牌价格的30%，性价比较高。因而，对于以上实验建议选用Biog、T等国产试剂盒。对于经费不多的课题研究或样本量较大的临床检测项目，建议选用国产试剂盒。对提取DNA的纯度要求相对较高的研究如直接测序，细胞转染等，则可考虑Q等国外知名品牌。
综上三点，与国外知名品牌相比，国产试剂盒在细胞DNA提取纯度上略有不足，但不影响大多数实验，特别是下游PCR扩增以及分子杂交类实验；在DNA提取得率上，国内试剂盒与国外品牌差别不大；而在价格方面，国产试剂盒具有比较明显的优势。如果经费充足，DNA纯度要求较高，可考虑选择Qiagen等国外知名品牌。如果经费不多或下游做PCR、qPCR、分子杂交等实验，可考虑选择性价比较高的Biog等国产品牌。
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