在细胞中的分布实验必须要用活细胞吗 观察DNA和RNA在细胞中的分布为什么要用B

观察DNA和RNA在细胞中的分布实验不需要用活细胞。观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中，由于使用盐酸，使细胞失去活性，所以不需要用活细胞。

观察DNA和RNA在细胞中的分布

工具

• 大烧杯、小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、吸水纸、显微镜。

• 人的口腔上皮细胞、蒸馏水、质量分数为0.9%的NaCl溶液、质量分数为8%的盐酸。

• 吡罗红甲基绿混合染色剂（ 取A液20mL、B液80mL配成染色剂，使用时现配。A液：取吡罗红甲基绿粉1g,加入100mL蒸馏水中溶解，放入棕色瓶中备用。B液：取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000mL。取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL。取稀释的乙酸钠溶液30mL和乙酸20mL，加蒸馏水50mL，pH为4.8的溶液）。

方法步骤：

• 一、制片：制作人口腔上皮细胞临时装片

• 1.在洁净的载玻片上用滴管滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。

• 2.用消毒牙签在自己的口腔内侧壁上轻刮几下，再把牙签上附有碎屑的一端放在液滴中涂抹几下。

• 3.用火柴点燃酒精灯，将涂有口轻上皮细胞的载玻片烘干。

  如图：

• 二、水解

• 1 .在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。

• 2.在大烧杯中加入30℃温水。

• 3.将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。

  如图：

• 三、冲洗

• 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。

  如图：

• 四、染色

• 1.用吸水纸吸去载玻片上的水分。

• 2.将吡罗红甲基绿混合染色剂滴2滴在载玻片上，染色5min。

• 3.吸去多余染色剂，盖上盖玻片。

  如图：

• 五、观察

• 1.低倍镜观察：选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰。

• 2.高倍镜观察：调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。可以清楚地看到被染成绿色的DNA主要集中于细胞核中，而被染成红色的RNA主要集中于细胞质中。如图所示：

  结论

• DNA主要分布于细胞核中，但细胞质中线粒体与叶绿体内也有少量分布。

• RNA主要分布于细胞质中，但大部分RNA是在细胞核中合成后被运往细胞质的。

DNA主要分布于细胞核中，RNA主要分布于细胞质中。
一般用吡罗红甲基绿混合染色剂将细胞染色以显示DNA和RNA在细胞中的分布。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色，以此达到区分的目的。
盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

RNA主要分布在细胞质中,细胞核里的核仁也有少量RNA。

RNA的分布：


图上是用吡罗红甲基绿染色液染色的蟾蜍血涂片。
由于DNA和RNA在化学组成与分子结构上存在一定的差别，因而对不同的染料有着不同的反应。所以，可以根据这一反应差异来研究细胞中DNA与RNA的分布情况。
DNA和RNA两种核酸分子都是多聚体，但是它们的聚合程度有所不同。DNA聚合程度高，易于甲基绿结合；RNA聚合程度低易于吡罗红结合。所以当吡罗红与甲基绿混在一起作为染料时吡罗红与核仁、细胞质中的RNA选择性结合，从而显示红色；甲基绿与染色质中的DNA选择性结合，从而显示绿色。

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